Pohranjivanje sperme

Ova metoda čuvanja sperme (ejakulata), poput krioprezervacije, postala je vrlo široko rasprostranjena u kriomedicini. To uključuje dodavanje posebnog medija u sjemenu tekućinu, i dalje zamrzavanje upotrebom tekućih para dušika. Uzmite u obzir ovu metodu očuvanja muških zametnih stanica i objasnite joj koja je sperma pogodna za razrjeđivanje i daljnje skladištenje.

Kako kriopreservacija povećava šanse za oplodnju?

Pri prirodnoj gnojidbi, tajna muških spolnih žlijezda se pomiješaju dijelom s epidermisom stanica, što rezultira određenom promjenom pH medija, što dovodi do uništavanja lipoproteinskog pokrova spermatozoida, tj. na njihovu aktivaciju. Budući da je u ovom stanju, životni vijek reproduktivnih stanica je ozbiljno ograničen, što isključuje njihovu daljnju uporabu za IVF. Zato se koristi metoda krioprezervacije.

Ova tehnika znatno povećava trajnost sperme i omogućuje:

• smanjiti motoričku aktivnost spermija;
• daje im dodatni izvor energije;
• štiti bakterijske stanične membrane od uništenja;
• sprječava nakupljanje toksičnih metaboličkih proizvoda;
• blokira reprodukciju mikroorganizama u ejakulatu.

Koji se mediji koriste za pohranu sjemena?

Da bi se olakšalo, tzv. Proces razbijanja ejakulata, nužan za izolaciju zametnih stanica iz njega, prethodno razrijedi spermu. Koriste se posebni reagensi.

Do danas je uobičajeno koristiti sintetičke medije za pohranu sjemena, od kojih svaka zahtijeva posebne uvjete. Tipično, ova vrsta okoliša sastoji se od nekoliko komponenti, obično najmanje tri. Dakle, u svojoj strukturi moguće je dodijeliti šećer, najčešće se koriste glukoza i laktoza, natrijev citrat.

Ako govorimo o specifičnim kemijskim spojevima koji se mogu upotrijebiti kao medij za pohranu sperme, tada se među njima mogu nazvati Tris-pufer, Trilon B, EDTA, Spermosan PPK.

Pod kojim uvjetima se ejakulacija pohranjuje?

Tehnologija zamrzavanja i skladištenja spermija zahtijeva pridržavanje posebnog režima hlađenja, kao i korištenje posebnih uređaja. U tom slučaju sama laboratorijska soba nužno mora biti opremljena uređajima koji steriliziraju zrak.

Prije sakupljanja ejakulata, svi potrebni uređaji za krioprezervaciju, posebno sve vrste tikvica, stupnjevitih cilindara, pipeta, papirnih filtera steriliziraju se u posebnom ormaru na temperaturi od 130-150 stupnjeva. Prije izravnog uzimanja uzoraka stavljaju se u poseban termostat koji održava stalnu temperaturu od 37 stupnjeva.

Jednom kada se uzorak muškog sperma uzme, stavlja se u sterilnu tikvicu. Temperatura pohrane sperme trebala bi biti konstantna. Postupak hlađenja provodi se u 2 faze.

Na prvoj od njih, ejakulacija se najprije smješta u hladnu sobu u kojoj se temperatura postepeno smanjuje. U pravilu, vrijednost je -35 stupnjeva. Nakon toga se provodi duboko zamrzavanje, uranjajući specijalnu tikvicu s spermom u tekući dušik. U tom stanju, rok trajanja sperme može doseći nekoliko desetljeća.

Da bi koristili ejakulatu, prethodno krio zadržani, posuda se zajedno s njim stavi u toplu vodu, gdje se odvija spor spuštanje. Nakon toga se uklanjaju korišteni krioprotektanti, ponovnim ponovnim taloženjem sperme na centrifugi. Nakon toga, sama se sjemena tekućina zamjenjuje hranjivim medijem u koji se naknadno smještaju spermatozoidi.